设计完sgRNA之后,就可以选择性克隆到此目的载体了。在这里我们选择lentiCRISPR v2载体作为例子说明。lentiCRISPRv2是张锋实验室发布一个慢病毒载体系统,cas9和sgRNA表达框在同一载体上。而且Cas9的C端带有F...
CRISPR/Cas系统全称为常间回文重复序列丛集/常间回文重复序列丛集关联蛋白系统(clustered regularly interspaced short palindromicrepeats/CRISPR-associated pr...
一、背景(介绍circRNA产生的一般原则和Alu元件)二、如何操作(如何精确找到circRNA两侧毗邻的Alu元件-两个实例)三、题外话(circRNA过表达成环载体介绍及效率比较)一、背景circbase数据库里POLR2A基因位产生的...
Cas9介导同源重组(HDR)的基本操作和做基因敲除(KO)基本一致(Fig 1),除了需要多引入一条修复模板(repair template)。顺利的情况下整套操作下来至少需要4周时间(心急吃不到热豆腐嘞~~),其中单克隆的获取和鉴定是最...
我们都知道一个基因(一个基因ID)往往可以编码多个转录本(多个NM号),相应的也对应多个蛋白质(多个NP号)。一条mRNA上编码蛋白质的区域称为CDS(coding sequence)。一个基因产生的多个mRNA往往有部分区域是重叠的(图4...
服务简介 Cas9蛋白的CDS长达4kb,克隆难度和包毒难度都相对大,将Cas9基因高效导入细胞是应用Cas9/CRISPR系统进行基因敲除的难点之一,极大地限制可供选择的将基因导入细胞的方法。并且在用CRISP...
Crispr/Cas9 简介CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。目前,...
AAV-SaCas9在体敲除技术服务汉恒生物技术工程师运用CRISPR/Cas9基因敲除技术,将腺相关病毒与SaCas9结合,即AAV-SaCas9,可以实现高效在体基因敲除,也是最新最领先的在体基因敲除技术。 欲了解AAV不同的血清型及滴...
CRISPR/Cas 系统全称为常间回文重复序列丛集/常间回文重复序列丛集关联蛋白系统(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISPR-associated ...